主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[Y393]抗DNA PKcs 适用对象:ChIC/CUT&RUN-seq、WB、IHC-P、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:人类

相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 中国 [Y393]到DNA PKcs -
宿主 兔子 -
特异性 这种抗体对DNA PKcs具有特异性。 它还可以检测剪接亚型2 根据WB结果推荐小鼠和大鼠种类,我们不保证小鼠和大鼠类的IHC-P。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 预测可用于: 老鼠、老鼠、亚美尼亚仓鼠 -
免疫原 人类DNA PKcs aa 4050中的合成肽到达C末端(C末端)。 确切的顺序是专有的。 数据库链接: 第78527页 -
阳性对照 WB:K562、MOLT4、SH-SY5Y、HeLa和野生型HAP1细胞裂解物; 野生型A549细胞裂解物; HDLM-2细胞裂解物。 ICC/IF:Hela细胞。 IHC-P:人乳腺癌组织切片,人扁桃体组织。 ChIC/CUT&RUN-Seq:U2OS细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 交付后,将等分样品储存在-20°C下。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 Y393年 -
同种型 免疫球蛋白G -
新冠肺炎疫苗
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 作为DNA损伤分子传感器的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。 参与双链断裂(DSB)修复和V(D)J重组所需的DNA非同源末端连接(NHEJ)。 必须与DNA结合才能表达其催化特性。 通过激活发夹内切酶artemis(DCLRE1C)促进V(D)J重组中发夹DNA结构的处理。 NHEJ连接步骤还需要在DNA末端组装DNA-PK复合物。 需要保护和对齐DNA的断端。 也可以作为支架蛋白,帮助DNA修复蛋白定位到损伤部位。 发现于染色体末端,表明在维持端粒稳定性和防止染色体末端融合方面有进一步的作用。 也参与转录的调节。 识别底物一致序列[ST]-Q。 组蛋白变体H2AX/H2AFX的磷酸化酶“Ser-139”,从而调节DNA损伤反应机制。 磷酸化物DCLRE1C、c-Abl/ABL1、组蛋白H1、HSPCA、c-jun/jun、p53/TP53、PARP1、POU2F1、DHX9、SRF、XRCC1、XRCB1、XRCC4、XRCC5、XCC6、WRN、MYC和RFA2。 不仅在线性DNA存在下,而且在超螺旋DNA存在下可以磷酸化C1D。 在超螺旋DNA存在下磷酸化p53/TP53的能力依赖于C1D。 -
序列相似性 属于PI3/PI4-激酶家族。 包含1个FAT域。 包含1个FATC域。 包含2次HEAT重复。 包含1个PI3K/PI4K域。 包含3个TPR重复。 -
翻译后修饰 DNA损伤后发生磷酸化,可能是ATM或ATR引起的。 在Thr-2609、Thr-2638和Thr-2647上自动磷酸化。 Thr-2609是一个DNA损伤诱导的磷酸化位点(可通过电离辐射诱导,IR)。 自磷酸化诱导构象变化,导致DNA-PK复合物重塑,这是有效末端处理和DNA修复所必需的。 通过GAPDH进行S-亚硝基化。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 DNA依赖性蛋白激酶催化亚单位抗体 DNA PK催化亚单位抗体 依赖DNA的蛋白激酶催化亚单位抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗-DNA PKcs抗体[Y393](ab32566) 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: PRKDC敲除A549细胞裂解物 3号车道: K562细胞裂解物 车道4: HDLM-2细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 469千帕 观察到的频带大小: 450千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:稀释1/1000的抗-DNA PKcs抗体[Y393]染色,以绿色显示; 鼠抗CANX[CANX/1543]( ab238078型 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab32566显示与DNA PKcs特异性结合。 在野生型A549细胞裂解液中观察到450kDa的条带,在PRKDC敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 为了生成此图像,分析了野生型和PRKDC敲除A549细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在TBS-0.1%吐温®20(TBS-T)中的3%牛奶中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
车道1 :野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 2号车道 :DNA PKcs敲除HAP1细胞裂解物(20µg) 3号车道 :K562细胞裂解物(20µg) 4号车道 :SH-SY5Y细胞裂解液(20µg) 车道1-4 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在470 kDa下观察到ab32566。 红色-装载控制, 约7291 ,在52 kDa下观察到。 ab32566被证明与野生型HAP1细胞中的DNA PKC特异性反应。 当检测DNA PKcs敲除样品时,没有观察到条带。 野生型和DNA PKCs敲除样品进行SDS-PAGE。 ab32566和 约7291 (α-微管蛋白负荷控制)稀释1/1000和1/10000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( 邮编:216773 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
用纯化的ab32566以1/50的工作稀释度对石蜡包埋的人扁桃体进行免疫组织化学染色。 使用的二级抗体是兔IgG的HRP聚合物。 用苏木精对样品进行反染色。 使用pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行抗原检索。 -
用稀释度为1/100的纯化ab32566对HeLa细胞(用4%PFA固定)进行免疫荧光染色。 Alexa Fluor®555山羊抗兔抗体用作次级抗体,稀释度为1/200。 右侧面板显示DAPI反训练。 -
所有车道: 1/7300稀释(纯化)的抗-DNA PKcs抗体[Y393](ab32566) 车道1: MOLT4细胞裂解物 车道2: HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 469千帕 观察到的频带大小: 460千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞缓冲区:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
以1/5的工作稀释度用未纯化的ab32566对石蜡包埋的人扁桃体进行免疫组织化学染色。 使用的二级抗体是兔IgG的HRP聚合物。 用苏木精对样品进行反染色。 使用pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行抗原检索。 -
用稀释度为1/10的未纯化ab32566对HeLa细胞(用4%PFA固定)进行免疫荧光染色。 Alexa Fluor公司 ® 555羊抗兔抗体作为次级抗体,稀释度为1/200。 右侧面板显示DAPI反训练。 -
所有车道: 抗-DNA PKcs抗体[Y393](ab32566),稀释度为1/1000(未净化) 车道1: MOLT4细胞裂解物 车道2: HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 469千帕 观察到的频带大小: 460千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞缓冲区:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
未经纯化的ab32566,稀释1/50,用免疫组织化学方法对石蜡包埋的人类乳腺癌组织中的DNA-PKcs进行染色。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (36)
风扇Y 等。 PRKDC通过增强RNA Pol II与cccDNA的结合来促进乙型肝炎病毒的转录。 细胞死亡疾病 13:404 (2022). 公共医学:35468873 朗·Y 等。 黑磷量子点通过抑制DNA-PKcs激酶增强人肾癌细胞的放射敏感性。 细胞 11:不适用(2022年)。 公共医学:35626687 胡H 等。 NEAT1/miR-101依赖性DNA-PKcs上调增强胰腺导管腺癌细胞的恶性行为。 J癌症 12:5622-5632 (2021). 公共医学:34405022 Asleh K公司 等。 蛋白质组学衍生的基础生物标记物DNA-PKcs与乳腺癌的固有亚型和长期临床结局相关。 NPJ乳腺癌 7:114 (2021). 公共医学:34504086 金·A 等。 骨骼肌中USP21的消融促进氧化纤维表型,抑制肥胖和2型糖尿病。 J肌肉恶病质 12:1669-1689 (2021). 公共医学:34523817