重组抗细胞角蛋白20抗体[EPR1622Y]-细胞骨架标记（ab76126）

Western blot假彩色图像：抗细胞角蛋白20抗体[EPR1622Y]-细胞骨架标记1/10000稀释染色，绿色显示；小鼠抗GAPDH抗体[6C5](ab8245)在1/20000稀释度下加载控制染色，以红色显示。在Western blot中，ab76126与细胞角蛋白20特异性结合。首先，样品在SDS-PAGE凝胶上运行，然后转移到硝酸纤维素膜上。在3%的牛奶中，在TBS-0.1%吐温中，膜被阻塞^®20（TBS-T），然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。在TBS-T中洗涤印迹四次，在室温下与二级抗体一起培养1小时，再次洗涤四次，然后成像。使用的次级抗体是山羊抗兔IgG H&L（IRDye^®800CW）预吸收(ab216773号)山羊抗鼠IgG H&L（IRDye^®680RD）预吸收(ab216776号)稀释1/20000。

ab76126染色HT-29细胞角蛋白20，MCF7细胞呈阴性表达。细胞用100%甲醇固定（5min），用0.1%tritonx-100渗透5min，然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中阻断1h。然后在+4°C下用0.1µg/ml的ab76126将细胞培养过夜ab7291，以0.5µg/ml的浓度将小鼠单克隆[DM1A]转化为α-微管蛋白ab150081号山羊抗兔IgG-H&L多克隆次级抗体（Alexa Fluor^®488），在1/1000稀释度下预吸附（以绿色显示）和ab150119山羊抗小鼠IgG-H&L多克隆次级抗体（Alexa Fluor^®647），在1/1000稀释时预吸附（红色显示）。细胞核DNA用DAPI标记（蓝色）。

图像是用共焦显微镜（徕卡微系统公司TCS SP8）获得的，并显示了一个单一的共焦切片。

在相同的测试条件下，本产品还可与4%甲醛（10min）固定。

人结肠癌石蜡包埋组织ab76126 1/100稀释染色细胞角蛋白20。

在开始IHC染色前，进行热介导的抗原回收。

人结直肠癌HT-29细胞免疫细胞化学/免疫荧光分析1/500纯化ab76126标记细胞角蛋白20。细胞用100%甲醇固定。ab150077，Alexa Fluor公司^®以488株羊抗兔IgG（1/1000）为二级抗体。细胞核用DAPI（蓝色）复染。

二级对照：用PBS代替原抗体作为阴性对照。

一级：ab76126，1/50000稀释
样品：人小肠裂解物，10微克
二级：羊抗兔HRP，1/1000稀释

重叠直方图显示用ab76126（红线）染色的LoVo（人大肠腺癌细胞系）细胞。细胞用80%甲醇固定（5分钟），然后用0.1%PBS Triton X-100渗透20分钟。然后将细胞培养在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中，以阻断非特异性蛋白质相互作用，然后在22°C下用抗体（ab76126，1/1000稀释度）30分钟。使用的次级抗体是Alexa氟^®488山羊抗兔IgG（H&L）(ab150077)在22°C下，在1/2000稀释30分钟。同型对照抗体（黑线）为兔IgG（单克隆）（1µg/1x10⁶电池）在相同的条件下使用。未标记的样本（蓝线）也被用作对照。用20mW氩离子激光器（488nm）和525/30带通滤波器采集了大于5000个事件。 

一级：ab76126，1/50000稀释
样品：ab736400.01微克
次要：ab97080号，1/5000稀释

人结肠腺癌组织ab76126呈阳性染色。

在开始IHC染色前，进行热介导的抗原回收。

人膀胱移行细胞癌组织中ab76126呈阳性染色。

在开始IHC染色前，进行热介导的抗原回收。

ab76126显示阴性染色在人肝细胞癌组织中。

在开始IHC染色前，进行热介导的抗原回收。

ab76126显示阴性染色在人类乳腺癌组织中。

在开始IHC染色前，进行热介导的抗原回收。

应用ab76126对人结肠腺癌石蜡包埋组织的荧光免疫组化分析。绿色-CK20红色PI

在开始IHC染色前，进行热介导的抗原回收。