重组抗细胞周期蛋白D1抗体[EPR2241]-C-端子（ab134175）

封闭/稀释缓冲液：5%NFDM/TBST。

大鼠食管组织切片ab134175染色细胞周期蛋白D1的IHC图像福尔马林固定石蜡包埋切片，在徕卡邦德上进行。用柠檬酸钠缓冲液（pH6，表位恢复液1）对切片进行热介导抗原回收预处理20分钟。然后在室温下用工作浓度为5μg/ml的ab134175培养15分钟，并使用HRP结合紧密聚合物系统进行检测。用DAB作显色剂。然后用苏木精复染切片并用DPX固定。二级对照组（插图所示）未使用主要抗体。
对于其他IHC染色系统（自动和非自动），客户应优化可变参数，如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体培养时间。

用1/50稀释的纯化ab134175对Ramos（人类伯基特淋巴瘤细胞系）细胞（固定在4%PFA中，用0.1%tritonx100渗透）进行免疫荧光染色。Alexa Fluor公司^®以488只山羊抗兔抗体为二级，稀释1/500，用DAPI复染细胞。

阴性对照显示在右下角的面板上-阴性对照，Alex Fluor^®594山羊抗鼠剂按1/500稀释。

1/100稀释度纯化ab134175对人子宫内膜腺癌石蜡包埋的免疫组化染色。HRP山羊抗兔(ab97051)以1/500稀释度作为二级抗体，用苏木精复染。用pH9.0的Tris-EDTA缓冲液进行抗原回收。

用PBS代替原抗体作为阴性对照（inset）。

用抗CCND1蛋白ab134175的兔单克隆抗体，用224个石蜡切片，用标准SP法在3μm切片上对人头颈部鳞状细胞癌组织进行免疫组化。

展板C：cyclind1低表达的一个例子。

展板G：cyclind1高表达的一个例子。

完整的图片请看报纸。

MG-63细胞在37℃下与溶媒对照（0μM）和不同浓度的3-氨基苯甲酰胺（3-AB）孵育24小时(ab141069号)如文献所述，MG-63细胞周期蛋白D1（未纯化ab134175）的表达降低与3-氨基苯甲酰胺（3-AB）浓度增加相关。

用RIPA缓冲液（含蛋白酶抑制剂和原钒酸钠）制备全细胞裂解液，每种10μg装于凝胶上，WB在还原条件下运行。转移后，使用5%牛血清白蛋白将膜封闭1小时，然后与未纯化的ab134175以1/500稀释度和阿布8226在1μg/ml的温度下，在4°C下过夜抗兔HRP次级抗体(ab97051)稀释1/10000，用ECL显影液观察。

KN-93作用下人乳腺癌细胞系MCF7细胞周期蛋白D1的未纯化ab134175染色(ab120980).

细胞用100%甲醇固定（5min），用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸0.1%PBS-Tween封闭1h。然后用10μg/ml的ab134175培养细胞ab7291在1µg/ml下，在+4°C下过夜，然后在室温下与山羊进一步孵育1h兔抗亚历克斯488次要(ab150081号)2μg/ml（绿色显示）和山羊防鼠Alexa 594次要(ab150120型)浓度为2μg/ml（以伪红色显示）。用DAPI标记细胞核DNA。

阴性对照：1-兔源性和抗鼠二级抗体；2-小鼠一级抗体和抗兔二级抗体。对照1和对照2表明，所用的主要抗体和次级抗体之间没有非特异性反应。

人食管福尔马林固定石蜡包埋组织切片中ab134175染色细胞周期蛋白D1的IHC图像。用柠檬酸钠缓冲液（pH6，表位恢复液1）对切片进行热介导抗原回收预处理20分钟。然后在室温下用工作浓度为5μg/ml的ab134175培养15分钟，并使用HRP结合紧密聚合物系统进行检测。用DAB作显色剂。然后用苏木精复染切片并用DPX固定。二级对照组（插图所示）未使用主要抗体。
对于其他IHC染色系统（自动和非自动），客户应优化可变参数，如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体培养时间。
*从人类研究组织库获得的组织，由NIHR剑桥生物医学研究中心支持

石蜡包埋人外套细胞淋巴瘤组织的免疫组化分析，用1/100稀释度未纯化的ab134175标记细胞周期蛋白D1。

在开始IHC染色前，进行热介导的抗原回收。

封闭/稀释缓冲液：5%NFDM/TBST。

封闭/稀释缓冲液：5%NFDM/TBST。

封闭稀释缓冲液：5%NFDM/TBST。

宫颈腺癌细胞系HeLa（人宫颈腺癌上皮细胞系）的免疫细胞化学分析，以1/200的稀释度用ab134175标记cyclind1。多聚甲醛固定细胞，用0.5%tritonx-100在PBS中渗透。用原抗体在22℃孵育1小时，免疫染色后用DAPI复染细胞。

见Abreview

ab134175（纯化）在人表皮样癌细胞系A431细胞中1/30免疫沉淀细胞周期蛋白D1。western印迹法以HRP结合的羊抗兔IgG作为二级抗体（1/1000）。

封闭/稀释缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST。