重组抗CD34抗体[EP373Y]（ab81289）

用1/50稀释度（10ug/ml）纯化ab81289标记CD34的TF-1（人红白血病）细胞内流式细胞术分析。细胞用4%多聚甲醛固定，90%甲醇渗透。山羊抗兔IgG（Alexa Fluor^®以488（1/2000稀释度）作为次级抗体。以兔单克隆IgG（黑色）为同型对照，未经一级抗体和二级抗体（蓝色）孵育的细胞作为未标记对照

1/2500纯化ab81289标记人肾组织CD34的免疫组织化学（福尔马林/PFA固定石蜡包埋切片）分析。用pH9的Tris/EDTA缓冲液进行热介导抗原回收(ab97051)以1/500作为二级抗体。阴性对照用PBS代替原抗体。用苏木精染色。

人脐静脉内皮细胞系（HUVEC）细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析纯化ab81289在1/100处标记CD34。细胞用4%多聚甲醛固定，0.1%曲通X-100渗透。Alexa Fluor公司^®488结合山羊抗兔IgG(ab150077)（1/500）作为二级抗体。用DAPI（蓝色）作为核反染剂。

对照组：一级抗体（1/100）和二级抗体，ab150120型一辆Alexa Fluor^®488例山羊抗鼠IgG（1/500）。

1/2500纯化ab81289标记大鼠肾组织CD34的免疫组织化学（福尔马林/PFA固定石蜡包埋切片）分析。用pH9的Tris/EDTA缓冲液进行热介导抗原回收。山羊抗兔IgG H&L（HRP）(ab97051)以1/500作为二级抗体。阴性对照用PBS代替原抗体。苏木精反染色。

4%PFA固定，0.2%tritonx-100渗透性冷冻大鼠肺组织，用ab81289标记CD34，稀释度为1/50（11.04µg/mL），随后进行免疫组化分析ab150077山羊抗兔IgG H&L（Alexa Fluor®488），稀释1/1000（绿色）。大鼠肺染色阳性。被观察到。核染色是蓝色的。

二级抗体控制：二级抗体为ab150077山羊抗兔IgG H&L（Alexa Fluor®488），稀释1000倍。

用柠檬酸钠缓冲液（10毫米柠檬酸pH 6.0+0.05%吐温-20）回收抗原。

4%PFA固定，0.2%tritonx-100渗透性冷冻大鼠肾组织，用ab81289标记CD34，稀释度为1/50（11.04µg/mL），随后进行免疫组化分析ab150077山羊抗兔IgG H&L（Alexa Fluor®488），稀释1/1000（绿色）。大鼠肾脏染色阳性。被观察到。核染色是蓝色的。

二级抗体控制：二级抗体为ab150077山羊抗兔IgG H&L（Alexa Fluor®488），稀释1000倍。

用柠檬酸钠缓冲液（10毫米柠檬酸pH 6.0+0.05%吐温-20）回收抗原。

见Abreview

小鼠正常脑组织CD34染色的IHC图像福尔马林固定石蜡包埋切片，在Leica键上进行^TM公司系统采用标准方案B。用柠檬酸钠缓冲液（pH6，表位检索溶液1）对切片进行热介导抗原回收预处理20分钟。然后用未纯化的ab81289，1/250稀释液在室温下培养15分钟。用山羊抗兔生物素化二级抗体检测原发性，并用HRP结合ABC系统进行可视化。用DAB作显色剂。然后用苏木精复染切片并用DPX固定。

对于其他IHC染色系统（自动和非自动），客户应优化可变参数，如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体培养时间。

封闭稀释缓冲液及浓度：5%NFDM/TBST

用纯化的ab81289在1/30稀释度下从TF-1（人骨髓红白血病细胞）细胞中免疫沉淀CD34。免疫沉淀用ab81289进行Western印迹。以羊抗兔IgG（H+L）、过氧化物酶偶联物为次级抗体，稀释1/1000。封闭稀释缓冲液及浓度：5%NFDM/TBST

见Abreview

人胚胎干细胞源性内皮细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析未纯化ab81289标记CD34。细胞用4%多聚甲醛固定，0.2%阿特尔顿X-100渗透。Alexa Fluor公司^®在1/400稀释度下使用647结合二级抗体。用DAPI（蓝色）作为核反染剂。