重组抗CD34[希腊语]希腊语[EP373Y]（ab81289）

用纯化的ab81289在1/50稀释度（10ug/ml）（红色）下标记CD34的TF-1（人红白血病）细胞的细胞内流式细胞术分析。细胞用4%多聚甲醛固定，用90%甲醇渗透。山羊抗兔IgG（Alexa Fluor^®488）（1/2000稀释）作为次级抗体。使用兔单克隆IgG（黑色）作为同型对照，使用未与一级抗体和二级抗体（蓝色）孵育的细胞作为未标记对照。 

免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）分析人肾组织标记CD34，纯化ab81289为1/2500。使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP）(ab97051型)以1/500作为二级抗体。阴性对照使用PBS代替一抗。苏木精反染。

HUVEC（人脐静脉内皮细胞系）细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析用纯化的ab81289标记CD34（1/100）。细胞用4%多聚甲醛固定，并用0.1%Triton X-100渗透。Alexa Fluor公司^®488-结合山羊抗兔IgG(约150077)（1/500）作为第二抗体。DAPI（蓝色）作为核反染剂。

对照：仅二级抗体，约150120，Alexa Fluor^®488-共轭山羊抗鼠IgG（1/500）。

免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）分析大鼠肾脏组织标记CD34，纯化ab81289为1/2500。使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。山羊抗狂犬病IgG H&L（HRP）(ab97051型)以1/500作为二级抗体。阴性对照使用PBS代替一抗。苏木精反染。

4%PFA固定、0.2%Triton X-100渗透冷冻大鼠肺组织标记CD34的免疫组织化学分析，ab81289以1/50（11.04µg/mL）稀释，然后约150077羊抗狂犬病IgG H&L（Alexa Fluor®488），稀释度为1/1000（绿色）。大鼠肺组织染色阳性。观察到。核复染物是DAPI（蓝色）。

二级抗体控制：二级抗体为约1500771000倍稀释的山羊抗狂犬病IgG H&L（Alexa Fluor®488）。

使用柠檬酸钠缓冲液（10mM柠檬酸盐pH 6.0+0.05%吐温-20）进行热介导抗原回收。

4%PFA固定、0.2%Triton X-100渗透冷冻大鼠肾组织标记CD34的免疫组织化学分析，ab81289以1/50（11.04µg/mL）稀释，然后约150077羊抗狂犬病IgG H&L（Alexa Fluor®488），稀释度为1/1000（绿色）。大鼠肾脏染色阳性。观察到。核复染物是DAPI（蓝色）。

二级抗体控制：二级抗体为约1500771000倍稀释的山羊抗狂犬病IgG H&L（Alexa Fluor®488）。

使用柠檬酸钠缓冲液（10mM柠檬酸盐pH 6.0+0.05%吐温-20）进行热介导抗原回收。

参见Abreview

Leica Bond上进行的小鼠正常脑福尔马林固定石蜡包埋组织切片CD34染色的IHC图像^TM（TM）系统使用标准方案B。使用柠檬酸钠缓冲液（pH6，表位检索溶液1）热介导抗原检索对切片进行预处理20分钟。然后在室温下用未纯化的ab81289，1/250稀释液培养切片15分钟。山羊抗兔生物素化二级抗体用于检测初级抗体，并使用HRP缀合的ABC系统进行可视化。DAB被用作显色剂。然后用苏木精对切片进行复染，并用DPX固定。

对于其他IHC染色系统（自动化和非自动化），客户应优化可变参数，如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。

封闭和稀释缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST

使用纯化的ab81289以1/30稀释度从TF-1（人骨髓红白血病细胞）细胞中免疫沉淀CD34。使用ab81289从免疫沉淀物中进行蛋白质印迹。山羊抗狂犬病IgG，（H+L），过氧化物酶偶联物用作次级抗体，稀释度为1/1000。阻塞和稀释缓冲液和浓度：5%NFDM/TBST

参见Abreview

人胚胎干细胞衍生内皮细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析，用未纯化的ab81289标记1/200处的CD34。细胞用4%多聚甲醛固定，用0.2%aTriton X-100渗透。Alexa Fluor公司^®647结合二级抗体以1/400的稀释度使用。DAPI（蓝色）作为核反染剂。