抗-Calpin 1基因[EP798Y]（AB467）

用纯化的AB467在1/500稀释液中标记C2C12（小鼠成肌细胞成肌细胞）细胞标记Calpin 1的免疫细胞化学/免疫荧光分析。用4%聚甲醛固定细胞，0.1% Triton X-100透皮。细胞被复染AB19589抗α-微管蛋白抗体[DM1A] - Microtubule Marker（Alexa For）^®594）1/200（2.5μg/ml）。AB1500羊抗兔IgG（Alexa For）^®488）以1:1000稀释液作为第二抗体。DAPI核复染剂PBS代替原代抗体作为二次抗体对照。

阻隔和稀释缓冲液：5% NFDM/TBST。

免疫组化（福尔马林/PFA固定石蜡切片）分析人肺癌组织切片，用纯化的AB467 941:1稀释标记Calpin 1。使用热介导的抗原检索。AB93684B（TrIS/EDTA缓冲液，pH 9）。用苏木精对组织进行染色。免疫组化一步法HRP聚合物（即刻使用）二次抗体。

PBS代替原代抗体作为阴性对照（插图）。

用AB467 90对新生猪注射Dox（LV心肌）和PBS（不衰LV心肌）染色Calpin 1。在蛋白质水平上，与对照组（PBS）相比，在DOX注射的动物中观察到钙调素1的两倍以上的增加。

对甲醛固定，0.25% Triton X-100渗透的小鼠胸主动脉平滑肌细胞，用AB467 94-在ICC/IF 1/100稀释后标记Calpin 1，接着是山羊抗兔IgG H＆L（Alexa Furor 488）。AB1500）稀释度为1/400。

1.5% BSA用作25℃30分钟的封闭剂，在4℃下用一次抗体孵育24小时。

VSMC以低密度接种至35毫米板，避免细胞重叠。固定后，VSMCs用0.25% Triton X-100处理20分钟。

见复审

免疫组化（福尔马林/PFA固定石蜡切片）分析小鼠心肌组织切片，用纯化的AB467 941:1000标记Calpin 1。使用热介导的抗原检索。AB93684B（TrIS/EDTA缓冲液，pH 9）。用苏木精对组织进行染色。免疫组化一步法HRP聚合物（即刻使用）二次抗体。

PBS代替原代抗体作为阴性对照（插图）。

阻隔和稀释缓冲液：5% NFDM/TBST。

免疫组化（福尔马林/PFA固定石蜡切片）分析大鼠肺组织切片，用纯化的AB467 941:1稀释标记Calpin 1。使用热介导的抗原检索。AB93684B（TrIS/EDTA缓冲液，pH 9）。用苏木精对组织进行染色。免疫组化一步法HRP聚合物（即刻使用）二级抗体。

PBS代替原代抗体作为阴性对照（插图）。

免疫细胞化学/免疫荧光法检测猪主动脉平滑肌细胞中Calpin 1的未纯化AB467

细胞经多聚甲醛固定，在0.1% Triton X-100中通透。样品在25℃下用1/50的初级抗体孵育1小时，所用的第二抗体是AB67 17山羊多克隆兔IgG -H和L（FITC）（绿色）使用1/400稀释。

见复审

UT肌上皮细胞（左板）和子宫肌层（右板）的代表性显微照片用平滑肌细胞标记物、α-SMA（红色）和[AB467 94]（绿色）和DAPI（蓝色）染色。从小鼠妊娠第19天采集UT肌瘤细胞和全子宫组织。胎盘和胚胎从整个坐骨组织切片中取出。

详情请参阅纸张。

未经纯化的ICC/IF图像γAB4694-染色人宫颈上皮癌细胞系HeLa（宫颈上皮癌细胞系）。

将细胞固定于100%甲醇（5分钟），然后在1% BSA／10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育1pB-吐温1h，以使细胞通透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。然后将细胞与抗体（AB467 95，5μg/ml）隔夜培养4°C，第二抗体（Green）为DyLight。^®488山羊抗兔IgG -H＆L，预吸附（AB96899在1/250稀释液中使用1h。Alexa Fluor^®用594 WGA标记细胞膜（红色），稀释1/200小时，用DAPI染色1.43μm的细胞核（蓝色）。

未纯化的AB467 94- 1/100稀释法石蜡包埋人平滑肌的免疫组织化学染色

见复审

未纯化的AB467在正常肺血管组织中呈阳性染色。

未纯化的AB467在正常肾血管组织中呈阳性染色。

未纯化的AB467在正常扁桃体血管组织中呈阳性染色。

未纯化的AB467在正常子宫组织中呈阳性染色。

未纯化的AB467在骨骼肌组织中呈阴性染色。