主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EP1569Y]到βIII管蛋白-神经元标记物 适用于:流式细胞周期(内部)、mIHC、ICC/IF、WB、IHC-P 淘汰验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP1569Y]至βIII管蛋白-神经元标记物 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 预测可用于: 斑马鱼 -
免疫原 人βIII管蛋白aa 400到C末端(C末端)的合成肽。 确切的顺序是专有的。 数据库链接: 问题13509 -
阳性对照 ICC/IF:PC-12、HAP1和HeLa细胞。 WB:HAP1细胞裂解物。 HeLa、HCT116、PC-12和HEK-293全细胞裂解液。 小鼠和大鼠的大脑和脊髓组织裂解物。 IHC-P:人类乳腺癌组织。 mIHC:人类小脑组织 流式细胞仪(内部):U-87 MG和HeLa细胞。 IHC-Fr:斑马鱼视网膜切片。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 交付后,将等分样品保存在-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:9%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA、50%组织培养上清液 -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EP1569Y系列 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 HRP抗βIII管蛋白抗体[EP1569Y]-神经标记物( 约190574 ) Alexa Fluor®647抗β-III管蛋白抗体[EP1569Y]-神经标记物( 约190575 ) 生物素抗βⅢ-管蛋白抗体[EP1569Y]-神经标记物( 约195903年 ) Alexa Fluor®594抗β-III Tubulin抗体[EP1569Y]-神经标记物( 约201740 ) Alexa Fluor®555抗β-III管蛋白抗体[EP1569Y]-神经标记物( 公元202519年 ) 抗β-Ⅲ型管蛋白抗体[EP1569Y]-BSA和无叠氮化合物( ab221935年 ) APC抗βIII管蛋白抗体[EP1569Y]-神经标记物( 约224977 ) PE抗βIII管蛋白抗体[EP1569Y]-神经标记物( 约224979 )
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兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 微管蛋白是微管的主要成分。 它结合两摩尔GTP,一个位于β链上的可交换位点,另一个位于α链上的不可改变位点。 TUBB3在正确的轴突引导和维持中起着关键作用。 -
组织特异性 表达主要局限于中枢和外周神经系统。 -
疾病相关 TUBB3的缺陷是先天性3A型眼外肌纤维化(CFEOM3A)的原因[MIM:600638]。 一种先天性眼球运动障碍,表现为限制性眼肌麻痹,影响由动眼神经和/或滑车神经支配的眼外肌。 它的临床特征是向下凝视时眼睛固定、上睑下垂和头部后倾。 先天性眼外肌3型纤维化是一种非进行性、常染色体显性遗传病,其表现多种多样。 患者可能是双侧或单侧受累,他们的眼球运动缺陷包括完全性眼肌麻痹(眼睛固定在低斜视和外斜视位置),以及轻度无症状的眼球运动受限。 眼睑下垂、屈光不正、弱视和代偿性头部位置与更严重的疾病相关。 在某些情况下,眼部表型伴有其他特征,包括发育迟缓、胼胝体发育不全、基底神经节畸形、面部无力、多发性神经病。 -
序列相似性 属于微管蛋白家族。 -
结构域 高酸性C末端区域可能结合钙等阳离子。 -
翻译后修饰 C末端的一些谷氨酸残基是聚谷氨酰化的。 这种修饰只发生在谷氨酸残基上,并导致γ-羧基上的聚谷氨酸链。 由于人体中缺少功能性TTLL10,因此也会发生单甘醇化,但不会发生多甘醇化。 单糖基化主要局限于纳入轴突(纤毛和鞭毛)的微管蛋白,而谷氨酰化则普遍存在于神经元细胞、中心粒、轴突和有丝分裂纺锤体中。 这两种修饰可以共存于相邻残基上的同一蛋白质上,降低糖基化水平会增加聚谷氨酰胺化,并相互促进。 这种修饰的确切功能尚不清楚,但它们调节轴突微管的组装和动力学。 -
细胞定位 细胞质>细胞骨架。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 10381 人类 Entrez基因: 22152 鼠标 Entrez基因: 246118 老鼠 Omim公司: 602661 人类 瑞士保护银行: 问题13509 人类 瑞士保护银行: 第9季度第7季度 鼠标 瑞士保护银行: 问题4QRB4 老鼠 尤尼金: 511743 人类
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别名 β3微管蛋白抗体 β4抗体 β-4抗体
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图片
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使用ab52623对碘谷氨酸能神经元(人iPSC-Derived谷氨酸能神经, ab259259号 )诱导后11天进行分化。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%PBS吐温透化5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在+4°C下用0.1μg/ml的ab52623和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]至α-管蛋白,稀释度为1/1000。 然后将细胞与 约150081 、羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 ab150120型 ,山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor®594),以1/1000稀释度预吸附(以红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用Perkin Elmer Operetta HCA采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
所有车道: 抗β-Ⅲ型管蛋白抗体[EP1569Y]-神经标记物(ab52623),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HCT116细胞裂解物 车道2: TUBB3敲除HCT116细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在52 kDa下观察到ab52623。 红色-加载控制 约8245 在37kDa下观察到。 ab52623抗β-III Tubulin抗体[EP1569Y]-神经标记物在western blot中显示与野生型HCT116细胞中的β-III Tubulin特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约266900 (敲除细胞裂解物 ab257070型 )已使用。 野生型和β-III Tubulin敲除样品接受SDS-PAGE。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab52623和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4点孵育过夜 ° 稀释度分别为1/1000和1/2000时的C。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
人类小脑组织的荧光多重免疫组织化学分析(福尔马林固定石蜡包埋切片)。 Neu-N的合并染色( 公元177487年 ; 黄色的; Opal™570)、抗βIII Tubulin(ab52623;红色;Opal™690)和抗GFAP( 约68428 ; 绿色; Opal™520)。 免疫染色在徕卡生物系统BOND上进行 ® 带Opal™套件的RX仪器。 切片经过三轮染色培养 公元177487年 (1/1000稀释),ab52623(1/200稀释)和 约68428 (1/250稀释); 每个都使用单独的荧光酪胺信号放大系统。 柠檬酸钠抗原回收(pH 6.0)用于酪胺信号扩增的两轮之间,以从上一轮中去除抗体,以避免任何交叉反应。 DAPI(蓝色)用作核反染剂。 -
ab52623染色野生型HAP1细胞中的β-III Tubulin (顶部面板) 和TUBB3敲除HAP1细胞 (底部面板) . 细胞用100%甲醇固定5分钟,用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与稀释度为1/500的ab52623一起孵育 约195889年 以1/250稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor)进一步孵育1小时 ® 488) ( 约150081 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 抗β-Ⅲ型管蛋白抗体[EP1569Y]-神经标记物(ab52623),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: TUBB3敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 50千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在50 kDa下观察到ab52623。 红色-抗GAPDH抗体[6C5]-负载控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab52623与野生型HeLa细胞中的βIII微管蛋白反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约255358 (敲除细胞裂解物 约263857 )已使用。 对野生型HeLa和TUBB3敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab52623和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗β-Ⅲ型管蛋白抗体[EP1569Y]-神经标记物(ab52623),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: βIII Tubulin敲除HAP1全细胞裂解物 3号车道: HeLa全细胞裂解物 车道4: HEK293全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在52 kDa下观察到ab52623。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 ab52623被证明与野生型细胞中的β-III Tubulin特异性反应,因为β-III Tubulin敲除HAP1细胞中的信号丢失。 野生型和β-III Tubulin敲除样品接受SDS-PAGE。 Ab52623和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别以1/1000和1/10000稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
在体内,CK1δT347在 反式 . D) T347处CK1δ的磷酸化不依赖于CK1活性。 用CK1抑制剂PF670462(PF670,1μM)、PF4800567(PF480,1μM)或D4476(30μM)处理过表达野生型CK1δ的HEK-293细胞3小时,然后添加DMSO或40 nM Calyculin A 30分钟。对细胞裂解物进行免疫印迹,以检测抗pT347或抗Myc抗体。 CK1抑制剂阻断了自身磷酸化诱导的迁移率改变,但不降低T347的磷酸化。 Myc-tagged CK1δ用花括号表示。 ab52623下面板。 -
ab52623染色NGF-分化的PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系)细胞中的β-III Tubulin。 用100%甲醇固定细胞(5分钟),然后用1%牛血清白蛋白/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab52623以5μg/ml和 约7291 以1µg/ml的浓度在+4°C下过夜,然后在室温下用AlexaFluor进一步培养1小时 ® 488山羊抗兔次级( 约150081 )2μg/ml(以绿色显示)和AlexaFluor ® 594山羊抗鼠次要( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以伪红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 阴性对照: 1–兔一级和抗鼠二级抗体; 2–小鼠一级抗体和抗兔二级抗体。 对照组1和2表明所用的一级和二级抗体之间没有非特异性反应。 -
ab52623,稀释1/50,用免疫组织化学石蜡包埋组织对人类乳腺癌组织中的III类β-管蛋白进行染色。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
重叠直方图显示用ab52623(红线)染色的U-87 MG(人类胶质母细胞瘤-星形细胞瘤上皮细胞系)细胞。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻止非特异性蛋白质相互作用,然后在22°C下抗体(ab52623,1/1000稀释)作用30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H&L)( 约150081 )1/2000稀释,在22°C下保持30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)( 约172730 ,0.1微克/1x10 6 )在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体在用4%多聚甲醛固定(10分钟)/用0.1%PBS-Tween渗透20分钟的U-87 MG细胞中发出阳性信号。 -
所有车道: 抗β-Ⅲ型管蛋白抗体[EP1569Y]-神经标记物(ab52623),稀释度为1/1000 车道1: 脑(小鼠)组织裂解物 车道2: 脑(大鼠)组织裂解物 3号车道: 脊髓(小鼠)组织裂解物 车道4: 脊髓(大鼠)组织裂解物 车道5: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®790)( 约175781 )稀释度为1/10000 观察到的频带大小: 52千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该印迹是在MOPS缓冲系统下使用4-12%双三凝胶生成的。 凝胶在200V下运行50分钟,然后在30V下转移到硝基纤维素膜上70分钟。 然后使用Licor封闭缓冲液封闭膜一小时,然后在4°C下与ab52623孵育过夜。 使用检测抗体结合 约175781 在室温下以1:10000稀释1小时,然后使用Licor Odyssey CLx成像。 -
抗β-Ⅲ型管蛋白抗体[EP1569Y]-1/10000稀释的神经标记物(ab52623)+10µg的HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞裂解液 次要 1/2000稀释的山羊抗兔HRP 观察到的频带大小: 52千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞的细胞内流式细胞术分析,用ab52623标记1/20(红色)的βIII Tubulin。 细胞用4%多聚甲醛固定,用90%甲醇渗透。 Alexa荧光笔 ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/2000)作为二级抗体。 黑色-同位素对照,兔单克隆IgG。 蓝色-未标记对照,细胞未与初级和次级抗体孵育。
缔约方
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文献 (45)
罗塞特F 等。 凤凰听觉神经元作为3R细胞模型,用于高通量筛选神经原化合物。 听力恢复 414:108391 (2022). 公共医学:34844170 罗塞特F 等。 NADPH氧化酶3缺乏可防止噪声引起的感音神经性听力损失。 前电池开发生物 10:832314 (2022). 公共医学:35273964 He X公司 等。 泪腺导管阻塞后泪腺微环境的变化。 投资眼科视觉科学 63:14 (2022). 公共医学:35289845 徐国荣 等。 含透明质酸基水凝胶的人脂肪组织无细胞提取物通过M2小胶质细胞/微胶质细胞极化减轻脊髓损伤模型中的炎症。 小型 18:e2107838(2022)。 公共医学:35333441 姚明M 等。 miR-99家族是逆转二氧化铈纳米颗粒诱导的胎盘细胞功能障碍的潜在靶点。 Ann Transl医学 10:402 (2022). 公共医学:35530934