重组抗-ATG9A抗体[EPR2450（2）]（ab108338）

车道1：野生型HAP1细胞裂解物（20µg）
2号车道：ATG9A敲除HAP1细胞裂解物（20µg）
3号车道：HepG2细胞裂解物（20µg）
4号车道：A375细胞裂解物（20µg）
1-4车道：合并信号（红色和绿色）。绿色-在100和130 kDa时观察到ab108338。红色-装载控制，约8245，在37 kDa下观察到。

当使用ATG9A敲除样品时，未纯化的ab108338显示与ATG9A特异性反应。野生型和ATG9A敲除样品进行SDS-PAGE分析。ab108338和约8245（GAPDH的负荷控制）稀释1/1000和1/2000，并在4°C下培养过夜。用山羊抗兔IgG H&L（IRDye^®800CW）预吸附床(ab216773号)和山羊抗鼠IgG H&L（IRDye®680RD）预吸附床(约216776)二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1h。

AP-4μ4突变患者成纤维细胞TGN处ATG9A的积累。

皮肤成纤维细胞来自一名对照个体和两名患者，其AP4M1基因编码AP-4μ4的突变为纯合子。

成纤维细胞内源性ATG9A（绿色）和AP-4ε（红色）（B）或GM130的联合免疫抑制。

使用ab108338检测ATG9A。

（摘自De Pace等人的图4B）

用纯化ab108338在1:50稀释度（4.12μg/ml）下标记ATG9A的人甲状腺癌组织切片的免疫组织化学（福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片）分析。热介导抗原检索使用约93684（Tris/EDTA缓冲液，pH 9.0）。用苏木精对组织进行复染。免疫组织探针一步法HRP聚合物（即用型）二级抗体以1:0的稀释度使用。以PBS代替一抗作为阴性对照。

用纯化ab108338在1/20稀释度（10µg/ml）（红色）下标记ATG9A的HepG2（人肝癌上皮细胞）细胞的细胞内流式细胞术分析。细胞用100%甲醇固定，并用0.1%吐温-20渗透。山羊抗兔IgG（Alexa Fluor^®488）二级抗体以1/2000稀释度使用。同位素对照-兔单克隆IgG（黑色）。未标记对照-未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞（蓝色）

用纯化的ab108338在1:100稀释度下标记ATG9A的HepG2（人肝癌上皮细胞）细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析。细胞固定在4%的多聚甲醛中，并用0.1%的tritonX-100渗透。约150077山羊抗兔IgG（Alexa Fluor^®488）作为二级抗体，稀释度为1:1000。DAPI核复染。用PBS代替一级抗体作为二级抗体对照。

我们建议样品在裂解后不要煮沸。
封闭和稀释缓冲液：5%NFDM/TBST

暴露时间：
左图像：5秒
右图：2秒

在HEK-293（人胚胎肾上皮细胞）全细胞裂解液中以1:20稀释度（2μg）纯化ab108338（纯化）免疫沉淀ATG9A。

车道1（输入）：HEK-293（人胚胎肾上皮细胞）全细胞裂解物10μg
车道2（+）：ab108338&HEK-293（人胚胎肾上皮细胞）全细胞裂解物
车道3（-）：兔单克隆IgG(约172730)代替HEK-293（人胚胎肾上皮细胞）全细胞裂解液中的ab108338

用于蛋白质印迹，用于IP检测试剂（HRP）的VeriBlot(阿布131366)用于1:1000稀释度下的检测。输入通道中没有条带是由于煮沸的裂解物造成的
封闭和稀释缓冲液：5%NFDM/TBST。

封闭和稀释缓冲液：5%NFDM/TBST

裂解液煮沸。

封闭和稀释缓冲液：5%NFDM/TBST。

裂解液煮沸。

用细胞内流式细胞术对人肝癌HepG2细胞株进行非纯化ab108338染色ATG9A。用4%多聚甲醛固定细胞，并将样品与一级抗体以1/40的稀释度孵育。山羊抗兔IgG（Alexa Fluor^®488）以1/2000的稀释度作为次级抗体

同型对照：兔单克隆IgG（黑色）

未标记对照：未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞（蓝色）

用免疫组织化学方法对石蜡包埋的人类结肠组织中的ATG9A进行未纯化的ab108338（1/100）染色。

在开始IHC染色方案之前，用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。

未纯化ab108338，1/50稀释，免疫荧光染色HepG2（人肝癌上皮细胞）细胞中的ATG9A。