主要功能和细节
重组(无动物)生产,批次间一致性高,长期供应安全 兔抗AKT1单克隆抗体[EP2109Y] 适用范围:斑点杂交、细胞内ELISA、IHC-P、WB 与:小鼠、大鼠、人、重组片段反应

相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP2109Y]至AKT1(磷酸S473) -
宿主 兔子 -
特异性 AKT1(磷酸化S473)抗体(ab81283)检测在丝氨酸473处磷酸化的AKT1。在S473周围的AKT1区域与AKT2和AKT3中的相应区域具有高度相似性,因此如果在相应的丝氨酸残基上磷酸化,则可能与这些蛋白质发生交叉反应。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 小鼠,大鼠,人,重组片段 -
免疫原 -
阳性对照 WB:HeLa(无血清培养基培养过夜,150nM胰岛素处理5min)全细胞裂解物; MCF7(CCCP处理)全细胞裂解液; LNCaP(100nM Cacyculin A处理30min)全细胞裂解液; NIH/3T3(PDGF处理)全细胞裂解液; PC-12全细胞裂解物。 人宫颈癌组织。 斑点杂交:AKT1(磷酸化S473)磷酸肽。
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常规说明 Abcam推荐二级品-山羊抗兔HRP( ab205718 )还有山羊反兔亚历克萨·福罗 ® 488个( ab150077 ). 查看其他 抗兔次级抗体 可以和这种抗体一起使用。 本品为重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高了敏感性和特异性 -长期供应保障 -动物自由生产
了解更多信息 看这里 . 我们的教友 ® 这项技术是一项基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉马布 ® 专利 . 我们一直在努力工作,以确保我们为客户提供一流的抗体。 作为这项工作的结果,我们很高兴现在提供这种抗体的纯化形式。 我们正在更新我们的数据表。 纯化后的格式在我们的产品标签上标注为“PUR”。 如果您对此更新有任何疑问,请联系我们的科学支持团队。
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C(1-2周)。 交货时等分。 储存在-20°C。 避免冻融循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS,40%甘油(甘油,甘油),0.5%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EP2109Y型 -
同种型 免疫球蛋白 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
化验试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
同型控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
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应用
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靶标
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功能 在成人神经发生过程中,作为AKT-mTOR信号通路的关键调节剂,控制新生神经元整合过程的节奏,包括神经元的正确定位、树突的发育和突触的形成(通过相似性)。 能磷酸化几种已知蛋白质的通用蛋白激酶。 磷酸化TBC1D4。在磷脂酰肌醇3激酶(PI(3)K)下游传递信号,介导各种生长因子的作用,如血小板衍生生长因子(PDGF)、表皮生长因子(EGF)、胰岛素和胰岛素样生长因子I(IGF-I)。 通过介导胰岛素诱导的GLUT4葡萄糖转运蛋白转移到细胞表面,在葡萄糖转运中发挥作用。 介导IGF-I的抗凋亡作用。 通过在“Ser-939”和“Thr-1462”处磷酸化TSC2介导胰岛素刺激的蛋白质合成,从而激活mTORC1信号,导致4E-BP1的磷酸化和RPS6KB1的激活。通过介导胰岛素诱导的糖原合酶的激活促进糖原合成。 激活形式能抑制FoxO基因的转录,促进细胞周期的进展。 对SPATA13介导的细胞迁移和粘附组装与拆卸的调节至关重要。 -
组织特异性 在迄今分析的所有人类细胞类型中表达。 Tyr-176磷酸化形式在乳腺癌的进展阶段(即正常到增生(ADH)、导管原位癌(DCIS)、浸润性导管癌(IDC)和淋巴结转移(LNMM)阶段的表达显著增加。 -
疾病相关 AKT1的缺陷是导致乳腺癌(BC)易感性的原因[MIM:114480]。 一种源于乳腺上皮组织的常见恶性肿瘤。 乳腺肿瘤可以通过其组织学类型来区分。 浸润性导管癌是目前最常见的类型。 乳腺癌在病因和基因上是异质的。 家族性发生和双侧受累表明了重要的遗传因素。 多个基因座的突变可能涉及不同的家族,甚至是同一个病例。 AKT1的缺陷与结直肠癌(CRC)有关[MIM:114500]。 AKT1缺陷与卵巢癌易感性相关[MIM:604370]; 也称为家族性1型乳腺卵巢癌易感性(BROVCA1)。 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 AGC-Ser/Thr蛋白激酶家族。 RAC亚科。 包含1个AGC激酶C端结构域。 包含1个PH域。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
结构域 PH结构域与磷脂酰肌醇3-激酶α(PI(3)K)结合导致其靶向于质膜。 PH结构域介导与TNK2和Tyr-176的相互作用,对于这种相互作用也是必不可少的。 AGC激酶C端介导与THEM4的相互作用。 -
翻译后修饰 Thr-308、Ser-473和Tyr-474上的磷酸化需要完全活性。 活化的TNK2使其在Tyr-176上磷酸化,导致其与阴离子质膜磷脂PA结合。这种磷酸化形式定位于细胞膜,在细胞膜上,它被PDPK1和PDPK2靶向,进一步磷酸化Thr-308和Ser-473,导致其活化。 mTORC2对Ser-473的磷酸化作用有利于PDPK1对Thr-308的磷酸化作用,与AGAP2亚型2(PIKE-A)的相互作用增强了Ser-473的磷酸化。 在局灶性皮质发育不良中,Taylor型球囊细胞的Ser-473磷酸化增强。 泛素化; 同时经历“Lys-48”和“Lys-63”连接的多泛素化。 TRAF6诱导的“Lys-63”连接的AKT1泛素化对磷酸化和活化至关重要。 当泛素化时,它转移到质膜,在那里它变成磷酸化。 当完全磷酸化并转移到细胞核中时,在TTC3催化下发生“Lys-48”多泛素化,导致其被蛋白酶体降解。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 细胞膜。 整合素连接蛋白激酶1(ILK1)激活后的细胞核。 与TCL1A相互作用可促进核转位。 TNK2对Tyr-176的磷酸化导致其定位于细胞膜,在细胞膜上它被靶向进一步磷酸化Thr-308和Ser-473,导致其活化,活化形式转移到细胞核。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 207 人类 Entrez基因: 11651 老鼠 Entrez基因: 24185 老鼠 奥米姆: 164730 人类 瑞士保护: 第1749页 人类 瑞士保护: P31750页 老鼠 瑞士保护: 47196页 老鼠 单基因: 525622 人类
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别名 AKT 1抗体 AKT抗体 AKT1抗体
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图片
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所有车道: 抗AKT1(磷酸化S473)抗体[EP2109Y](ab81283),稀释1/25000 车道1: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)经100ng/ml PDGF处理1h 车道2: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 每道15µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051 )稀释1/20000 预测带大小: 56千伏安 观察到的频带大小: 56千伏安 曝光时间: 3分钟 阻断缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
所有车道: 抗AKT1(磷酸化S473)抗体[EP2109Y](ab81283),稀释1/1000 车道1: 人前列腺癌上皮细胞全细胞裂解物 车道2: 人前列腺癌上皮细胞LNCaP用0.1um的Calyculin A处理30分钟后全细胞裂解 车道3: A549(人肺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: 人乳腺癌上皮细胞MCF7全细胞裂解物 车道5: 人肝细胞癌上皮细胞HepG2全细胞裂解物 6号车道: 人脐静脉内皮细胞全细胞裂解 7号车道: C2C12(小鼠成肌细胞成肌细胞)全细胞裂解物 车道8: 小鼠脑溶解物 9号车道: 大鼠心脏裂解物 每道20微克的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051 ) 预测带大小: 56千伏安 曝光时间: 50秒 根据PMID:19372546报道,AKT1(phosphoc S473)在不同细胞系中的基本表达水平不同,但为了检测清楚的信号,强烈建议使用该抗体进行治疗。 封闭稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST -
ab81283,在1/100稀释度下,用福尔马林固定石蜡包埋组织,用免疫组织化学法对未治疗(左)和磷酸酶治疗(右)的人宫颈癌中的AKT1进行染色 在开始IHC染色前,进行热介导的抗原回收。 -
所有车道: 0.259微克/毫升的抗AKT1(磷酸化S473)抗体[EP2109Y](ab81283) 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)在无血清培养基中生长过夜,全细胞裂解 车道2: HeLa在无血清培养基中生长过夜,用150nM胰岛素处理5min,全细胞裂解 车道3: HeLa在无血清培养基中生长过夜,用150nM胰岛素处理5min,全细胞裂解。 然后用碱性磷酸酶孵育细胞膜 每道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051 )稀释1/20000 预测带大小: 56千伏安 封闭稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
免疫组织化学(福尔马林/PFA固定石蜡包埋切片)-抗AKT1(磷酸S473)抗体[EP2109Y](ab81283) 图片来自Henken FE等,摩尔癌症。 2011年6月10日; 10: 71.图7。; doi:10.1186/1476-4598-10-71; 2011年6月10日,分子癌症2011,10:71 非靶向siRNA转染人HPV16永生化角质形成细胞的免疫组化分析,用ab81283对AKT1(磷酸化S473)(绿色)进行染色。 在柠檬酸盐缓冲液(ph6)中通过热介导进行抗原回收。 用10%山羊血清封闭标本,用1/100的原抗体孵育。 荧光染色采用荧光染色法。 -
以1:1000稀释度(0.259μg/ml)用ab81283标记AKT1(磷酸化S473)磷酸肽(Lane 1)和AKT1非磷酸肽(Lane 2)的斑点杂交分析。 羊抗兔IgG,(H+L),过氧化物酶结合物( ab97051 )以1:20000的稀释度作为二级抗体。 阻塞缓冲器:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 0.259微克/毫升的抗AKT1(磷酸化S473)抗体[EP2109Y](ab81283) 车道1: 人前列腺癌上皮细胞全细胞裂解物 车道2: 100nM Cacyculin A处理LNCaP 30分钟全细胞裂解液 车道3: LNCaP用100nM Cacyculin A处理30min全细胞裂解液。 然后用碱性磷酸酶孵育细胞膜 每道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051 )稀释1/20000 预测带大小: 56千伏安 封闭稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 抗AKT1(磷酸化S473)抗体[EP2109Y](ab81283),稀释1/1000 所有车道: HEK293细胞裂解物 预测带大小: 56千伏安 胰岛素治疗:将细胞饥饿过夜,然后以100 ng/ml的剂量处理20分钟(胰岛素)。 磷酸酶处理:膜条与200微升的磷酸酶(150 U/ml)在37度下培养1小时。 -
所有车道: 抗AKT1(磷酸化S473)抗体[EP2109Y](ab81283),稀释1/1000 所有车道: NIH/3T3细胞裂解物 预测带大小: 56千伏安 PDGF处理:细胞饥饿过夜,然后用PDGF以100ng/ml处理1h。 磷酸酶处理:膜条与200微升的磷酸酶(150 U/ml)在37度下培养1小时。 -
主要:所有通道:1:5000稀释的抗AKT1(磷酸S473)抗体(ab81283)。 车道1=AKT1(His标记)全长重组蛋白 阿布62279 -50纳克。 第2道=NIH3T3血清饥饿过夜,15微克。 第3道=NIH3T3血清饥饿过夜,用PDGF-AB 50ng/mL治疗1小时,15微克。 次要:1-3道:利用ECL技术开发的山羊多克隆抗体H&L在1:5000预吸附(HRP)。 在还原条件下进行(50mM DTT,样品在60℃下加热)。 预测带宽:56kDa。 观察到的带大小:56kDa。 阻断步骤:5%牛奶在50mmtris中+0.05%吐温中在室温下放置1小时。一级抗体缓冲液:5%牛血清白蛋白在50mmtris中+0.05%吐温过夜。 二级抗体缓冲液:5%牛奶,50毫米Tris+0.05%吐温,室温下2小时。暴露时间:5分钟 -
将NIH3T3细胞饿死过夜,在用4%多聚甲醛固定前,用50ng/mL的PDGF或溶媒对照处理1小时。 用抗体ab81283在红外细胞内ELISA检测平台上检测总Akt水平。 -
PC12细胞在37°C下用溶媒对照(0 nM)和1μM甘丙肽(1-15)(猪,大鼠)(ab 141152)培养24小时。 如文献所述,PC12细胞中AKT1(磷酸化S473)(ab81283)的表达降低与甘丙肽(1-15)(猪、大鼠)浓度增加相关。 用RIPA缓冲液(含蛋白酶抑制剂和原钒酸钠)制备全细胞裂解液,每种30μg装于凝胶上,WB在还原条件下运行。 转移后,使用3%的牛奶将膜封闭1小时,然后在4°C下用1μg/ml的AB81283和1μg/ml的AB8227孵育过夜。 用与HRP结合的抗兔抗体检测抗体结合( ab97051 )在1/10000和可视化使用ECL开发解决方案。
数据表及文件
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数据表下载
文献 (481个)
傅杰 等等。 MicroRNA-451a通过3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1介导的PI3K/AKT信号通路阻止皮肤鳞状细胞癌的进展。 实验医学 21:116(2021年)。 公共医疗:33335579 李兹 等等。 Kcnh2介导FAK/AKT-FOXO3A通路减轻脓毒症所致心脏功能不全。 细胞增殖 54:e12962(2021年)。 公共医疗:33263944 刘X 等等。 槐耳通过PI3K/AKT/HIF-1a途径抑制肺癌细胞生长、迁移和能量代谢,具有抗癌作用。 细胞与分子医学杂志 25:2228-2237(2021年)。 公共医疗:33377619 陶洁 等等。 Sfrp1通过抑制Wnt/ß-catenin信号通路对老龄小鼠急性心肌缺血(AMI)损伤的保护作用。 心胸外科杂志 16: 12年(2021年)。 公共医疗:33468190 陈D 等等。 桔梗D通过microRNA-129-5p介导的PABPC1/PI3K/AKT轴失活对膀胱癌的抑制作用。 巴西医学生物研究所 54:e10222(2021年)。 公共医疗:33470388